【lb培养基的配方及制作过程】LB培养基(Luria-Bertani Broth)是一种广泛应用于分子生物学和微生物学实验中的基础液体培养基,主要用于大肠杆菌等细菌的增殖。其配方简单、成本低、操作方便,是实验室中常见的培养基之一。以下是对LB培养基配方及其制作过程的总结。
一、LB培养基的主要成分及作用
| 成分 | 含量 | 作用说明 |
| 胰蛋白胨 | 10 g/L | 提供氮源和氨基酸,促进细菌生长 |
| 酵母提取物 | 5 g/L | 提供维生素、矿物质和生长因子 |
| 氯化钠 | 5 g/L | 维持渗透压,维持细胞稳定 |
| 琼脂(如需制备固体培养基) | 15-20 g/L | 凝固培养基,形成固体表面 |
二、LB培养基的制作流程
1. 称量原料
根据所需体积,按上述比例称取胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。例如,配制1 L LB液体培养基,需称取10 g胰蛋白胨、5 g酵母提取物和5 g氯化钠。
2. 溶解
将称好的原料加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。可加热助溶,但避免沸腾。
3. 定容
用蒸馏水将溶液定容至1 L,确保最终浓度准确。
4. 分装与灭菌
将培养基分装到合适的容器中(如三角瓶或试管),盖好盖子后进行高压蒸汽灭菌(121℃,15 psi,20分钟)。灭菌后应冷却至室温备用。
5. 使用
灭菌后的LB培养基可用于接种细菌,也可根据需要添加抗生素或其他物质,制成选择性培养基。
三、注意事项
- 实验前应确认所用试剂的质量,避免杂质影响实验结果。
- 若用于固体培养基,需在灭菌前加入琼脂,并充分搅拌使其均匀溶解。
- 培养基应密封保存于4℃冰箱中,避免污染和变质。
通过以上步骤,可以高效、准确地制备出适合实验室使用的LB培养基,为后续的微生物培养和分子实验提供良好的基础条件。
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